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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
含糖子工作中的简化性和多个N-glycoproteins低表达出来技术会使对N-glycosylation成分的分析方式方法的描写最为吃力。在加测低丰度的N糖基化表达淀粉酶或肽段时,表中夹杂着丰富未表达的淀粉酶肽断,这很易将低丰度的糖基化表达淀粉酶肽段的移动信号遮盖住。凝素亲和法是目前为止糖淀粉酶质组学中使用最广泛泛的区分聚集方式方法。凝集素(lectin)是一个类糖配合淀粉酶质,能缜密甄别某种个性化成分的单糖或聚糖中特殊的糖基队列而与之配合,她们与糖链可逆性非共价配合,糖淀粉酶或糖肽被凝集素抓取往后,一般来说用特殊的单糖借助争夺配合凝集素将糖淀粉酶或糖肽洗刷回去。 蛋清质过酶解后确定凝集素(lectin)聚集N-糖基化肽段,接着用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中割掉连入在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该操作造成Asn大碳原子式量添加2.9890Da。然后用高定位精度LC-MS质谱仪检测工具脱糖后的肽段,完成搜索参数库,根本脱糖后大碳原子式量与之理论体系大碳原子式量的变迁与糖基化体现肽段的编码序列,导致来设定该蛋清质的N-糖基化位点。N-糖基化位点来设定后,再确定label-free的的工作原理对其确定参考值具体分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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